原因:HRP的濃度過高;
解決:稀釋HRP至少10倍。
原因:HRP的濃度過高;
解決:稀釋HRP至少10倍。
原因:HRP的濃度過高;
解決:稀釋HRP至少10倍。
原因:HRP的濃度過高;
解決:稀釋HRP至少10倍。
原因:
1.太多的HRP積聚導(dǎo)致信號(hào)快速的消退;
2.抗原或抗體的濃度不夠;
3.轉(zhuǎn)印不成功;
4.HRP或其他底物的效價(jià)降低。
解決:
1.稀釋HRP至少10倍;
2.增加其濃度;
3.尋找合適的轉(zhuǎn)移方法和條件;
4.選擇其他的合適底物。
原因:
1.HRP濃度過高;
2.封閉無效;
3.不適合的封閉試劑;
4.洗滌不充分和洗滌液的量;
5.膠片曝光過度;
6.抗原或抗體的濃度太高。
解決:
1.稀釋HRP至少10倍;
2.尋找合適的封閉方法;
3.選用其他的封閉試劑;
4.增加洗滌的時(shí)間,次數(shù);
5.減少曝光時(shí)間;
6.稀釋抗原或抗體。
原因:
1.蛋白質(zhì)沒有被充分轉(zhuǎn)??;
2.膜沒有預(yù)先浸濕;
3.在膠片和膜之間有氣泡。
解決:
1.尋找合適的轉(zhuǎn)移方法和條件;
2.在轉(zhuǎn)印前充分浸濕;
3.在暴光之前趕走氣泡。
原因:HRP標(biāo)記的抗體出現(xiàn)了積聚;
解決:稀釋HRP至少10倍。
原因:
1.HRP濃度過高;
2.SDS促使非特異蛋白質(zhì)條帶黏附在目的蛋白質(zhì)條帶上。
解決:
1.稀釋HRP至少10倍;
2.在操作過程中不要加SDS。