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Bioss產(chǎn)品星推薦|ELISA試劑盒 免費(fèi)代測 免費(fèi)代測
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時間:2018-12-10

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高靈敏度及特異性:可準(zhǔn)確識別樣本中低含量的目標(biāo)檢測物;

快速簡便操作:無需昂貴設(shè)備及相關(guān)操作經(jīng)驗(yàn);

穩(wěn)定性:實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好,變異系數(shù)低;

種類豐富:提供多種選擇性;

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)易于處理分析。

試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線示例


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以上列表中ELISA試劑盒均采用雙抗體夾心法,此方法是檢測抗原最常用的方法。


雙抗體夾心法ELISA實(shí)驗(yàn)方案

雙抗夾心法是指將特異性結(jié)合抗原的抗體包被于微孔板上,制備成固相抗體,向微孔板中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本,再與HRP標(biāo)記另一株特異性針對抗原的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,加入TMB底物顯色后,形成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與樣本中抗原的量呈正相關(guān),再由酸終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中抗原含量。

注:雙抗體夾心法必須采用經(jīng)測試過的配對抗體進(jìn)行。


ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

?在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢測各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、HCG等。

?只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體,就可以用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。

?如抗體的來源為血清,包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。

?如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。

?這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測。


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