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流式細(xì)胞檢測-同型對照的選擇(供參考)
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時間:2016-2-15
由于抗體與細(xì)胞間存在非特異性結(jié)合(如電荷間互吸等),流式抗體與細(xì)胞結(jié)合時有特異性結(jié)合部分和非特異結(jié)合部分,流式同型對照試劑 用于消除非特異結(jié)合所至非特異染色,嚴(yán)格來說,同型對照應(yīng)該是同一抗原抗體制備的生產(chǎn)廠家,同一種屬動物來源,同一種免疫球蛋白(包括亞型),同一熒光標(biāo)記,作用類似調(diào)零(一般陽性率控制在1~2%內(nèi))。特別是多標(biāo)調(diào)熒光補(bǔ)償時,做為參考。 熒光素直接標(biāo)記一抗:FITC標(biāo)記為例: 兔抗人的CD34/ FITC標(biāo)記的抗體(熒光素直接標(biāo)記一抗),抗體動物種屬來源Rabbit IgG 抗體,它的同型對照應(yīng)該是FITC標(biāo)記的Rabbit IgG(親和純化IgG)。注意同型對照的成份跟它的名稱是相同的。 使用標(biāo)記一抗:Rabbit Anti-CD34/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人CD34抗體IgG 同型對照: Rabbit IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔IgG 間接免疫熒光檢測:PE標(biāo)記為例 如果采用間接免疫熒光檢測:一抗+熒光PE標(biāo)記的二抗,抗體動物種屬來源為小鼠抗人的CD4抗體+羊抗小鼠IgG/PE標(biāo)記的二抗。 它的同型對照應(yīng)該是:親和純化小鼠IgG+羊抗小鼠IgG/PE標(biāo)記的二抗。 Mouse Anti-Human CD4 Monoclonal Antibody 小鼠抗人CD4抗體 同型對照: Mouse IgG + Goat Anti-mouse IgG/PE 純化小鼠IgG +羊抗小鼠IgG/PE標(biāo)記的二抗
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